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DNA测序仪Ion Proton型操作规程


一、检查气源

1.测序前确保Server处于打开状态、检查高纯氮气瓶气压(如低于500psi 需及时更换气瓶)、确保网页浏览器能登录上server。

2.打开氮气瓶,将输出气压调至30psi;打开Ion Proton电源。

二、Ion Proton 仪器清洗:

1.氯片清洗:配制氯液,点击Clean, 按提示选择氯洗,将两个氯洗管(各100ml)装在C1和C2位置,进行氯洗, 结束后按next 回到主界面。

2.按氯洗的方法进行18MΩ去离子水清洗。

三、Ion Proton 初始化:

1.用18MΩ水润洗W2试剂瓶和W1、W3试剂管,分别配制好W1、W2和W3试剂;

2.点击Initialize, 按照屏幕提示选择试剂盒类型,更换新的sippers,将W1、W2和W3试剂装在W1、W2和W3 位置,进行第一阶段初始化;

3.准备dGTP, dCTP, dATP和dTTP, 待第一阶段初始化结束,更换新的sippers,将装有dNTP的试剂管装在对应的位置,拧紧,进行最后初始化,结束后点Next,回主页面。

四、设置测序plan:

1.在网页浏览器地址栏输入server IP, 进入Torrent browser;

2.点击plan 进行设置:填写run name,选择正确的library kit, Templating kit, sequencing kit, Flows, Chip types, barcode及对应样本名称等。

五、Loading 芯片和上机测序:

1.点击Proton 主界面RUN,按屏幕提示对新的芯片进行Chip check, 结束后显示passed,将芯片取出进行loading;

2.Loading 芯片: ISP经引物和测序酶预结合后,使用芯片离心机进行芯片loading;

3.将loading好的芯片放在Proton基座上,选择设置好的plan后进行测序。测序时间500flows, 约2.5hr。

六、测序结束:

1.可登录torrent browser ,查看测序报告或下载数据文件;

2.对Proton进行18MΩ去离子水清洗和关机:关机步骤(tools-shutdown),注意关机前,确保数据已传输完成(即测序报告已出)。

3.关闭氮气瓶。



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